如何判斷是色譜柱出現問(wèn)題導致雙峰出現呢

　　明明實(shí)驗時(shí)只分析一種物質(zhì)，為什么峰圖會(huì )出現雙峰呢？通常情況下，正確的峰型應該是尖銳而對稱(chēng)的，出現雙峰應該是實(shí)驗過(guò)程中有錯誤的步驟導致的。液相色譜出現“雙峰”的原因有多。一般有以下幾種原因：色譜柱、溶劑、進(jìn)樣量、樣品特性和pH值。簡(jiǎn)單介紹其中色譜柱、溶劑因素導致出現雙峰及解決辦法。

　　如何判斷是色譜柱出現問(wèn)題導致雙峰出現呢？操作人員分析單一純物時(shí)，如果每個(gè)色譜峰都出現雙峰，可以確定是色譜柱頭受損或者是柱頭污染了。如果是色譜柱正常，進(jìn)樣量少并且色譜峰形為一大峰帶一小峰，不一定拖尾，這種情況可能是柱頭受堵?？梢詫⑸V柱反過(guò)來(lái)接，用流動(dòng)相或其它溶劑沖洗掉堵在柱頭的殘留物，然后再反過(guò)來(lái)，一般都能解決。如果反復還是不能解決問(wèn)題，可能是柱頭塌陷的問(wèn)題。液相色譜柱壽命在正確使用時(shí)可達2年以上，但是柱子使用一段時(shí)間后，可能有一些吸附作用的物質(zhì)保留于柱頂造成柱頭塌陷，這時(shí)可補加填料使柱效恢復。每次使用完色譜柱后，需用洗脫能力的洗脫液沖洗，以延長(cháng)色譜分析柱的壽命。

　　色譜柱頭塌陷的原因有多，比較常見(jiàn)的是色譜泵壓力過(guò)，填料壓碎產(chǎn)生空隙。除此之外還有諸如裝填時(shí)壓力過(guò)低，不密實(shí)；流動(dòng)相溶解填料，造成空隙；色譜柱入口篩板堵塞等原因。色譜篩板能地攔截樣品、流動(dòng)相或管線(xiàn)及密封件的顆粒物對色譜柱的污染，保護色譜柱和儀器。篩板使用一段時(shí)間后，攔截的污染物會(huì )堵塞篩板，因此需要定期更換。但是相較于損壞色譜柱，更換一個(gè)篩板顯得性?xún)r(jià)比更，成本更低廉。

　　溶劑問(wèn)題

　　反相色譜流動(dòng)相多為甲醇、乙腈、水，實(shí)驗中往往會(huì )從中加各種添加劑以改善分離性能。有時(shí)候為了樣品的溶解性或穩定性加入了一點(diǎn)的緩沖液，但是緩沖液的酸堿性可能會(huì )導致樣品轉化，從而產(chǎn)生雙峰現象?？梢愿鼡Q緩沖液或者更換流動(dòng)相試一試。

　　影響雙峰出現的原因還有多，比如樣品過(guò)柱載量，從而導致二次分配；儀器間隔記錄時(shí)間太短都有可能造成雙峰出現。因此具體情況要具體分析，以上僅供各位色譜工作者參考。